Cistro磁力架的应用之NGS建库篇
发布时间:2025-03-20 点击数:77
在当今科技发展飞速的时代,NGS(Next Generation Sequencing)建库技术作为DNA世界的密码解读者,正扮演着越来越重要的角色,已在癌症基因检测、遗传疾病筛查、微生物组研究等领域大放异彩,为科学研究和临床医学带来了革命性的变革。
NGS流程上大致可分为:样本核酸提取→文库构建→靶向捕获→上机测序→生信分析。建库技术的核心是将待测的DNA/RNA分子转化为能够被高通量测序仪器读取的文库,从而获取包含重要生物信息的序列数据。以DNA建库为例,建库流程包括:DNA片段化→末修加A→接头连接→纯化分选→文库扩增→文库纯化。
在纯化分选阶段,一般采取两步磁珠纯化,其优势是通过调整磁珠悬浮液与DNA样本体积比例选择性地结合不同大小的DNA片段,能有效去除接头、酶、dNTPs、PCR引物、引物二聚体、盐离子和其它杂质。根据磁珠优先吸附大片段原理,通过使用不同体积磁珠,第一步磁珠纯化去除大片段,第二步磁珠纯化去除小片段,从而得到合适片段长度文库。在这之中反应管多次置于磁力架上,通过吸附磁珠分离液体,避免了离心损伤,支持高效回收。
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